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  • 国家柑桔苗木脱毒中心建立基于柑橘花叶病毒的高效VIGS工具
    发布时间:2026/11/06 | 供稿:田旭斌 | 编辑:杜肖影 | 审核:周彦 曹孟籍 刘昭暾 谭志友打印

    近日,国家柑桔苗木脱毒中心在植物科学领域国际经典期刊《Plant, Cell & Environment》发表题为A citrus mosaic virus-based vector for virus-induced gene silencing in tobacco and citrus研究论文。

    柑橘遗传转化周期漫长,严重制约了其基因功能解析工作。病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术能够快速抑制靶标基因表达。柑橘花叶病毒(CiMV)可侵染柑橘属、枳属植物,且对多数寄主不产生明显侵染症状,不会干扰植株表型鉴定,具备开发VIGS载体的先天优势,适配柑橘这类世代周期长、遗传转化难度大的木本作物研究需求。

    研究团队依托前期构建的CiMV全长侵染性克隆CiMV211,成功构建pCiMV2101、pCiMV2102两套VIGS载体,两套载体均可在16c本氏烟植株上实现GFP有效沉默。研究选取八氢番茄红素脱氢酶(PDS)作为报告基因,对比108 bp、201 bp、408 bp三种目的片段插入长度的沉默效果:接种20 d后,pCiMV2102-PDS201处理组植株白化表型最为显著;RT-PCR检测结果表明,408 bp插入片段会在寄主体内发生丢失,108 bp、201 bp片段稳定性更优;RT-qPCR分析证实,pCiMV2102-PDS201组合沉默效率最高、沉默效果持续性最好,被确定为最优载体-插入片段组合。研究进一步将柠檬镁螯合酶亚基(SU)基因片段导入pCiMV2102载体,通过真空渗透法接种尤力克柠檬。接种60 d后可观测到叶片显著褪绿现象,SU表达水平显著下调,该抑制效应可维持至接种后90 d,证实这套VIGS体系可在柑橘植株上稳定发挥功能(图1)。

    图1 基于柑橘花叶病毒的高效VIGS体系建立

    西南大学柑桔研究所2024级在读博士研究生田旭斌和已毕业硕士研究生苏越为论文共同第一作者,宋震教授为论文通讯作者。该研究承蒙重庆市自然科学基金(CSTB2025NSCQ-GPX0476)和国家现代农业产业技术体系专项(CARS‐26‐05B)资助。

    论文链接:https://doi.org/10.1111/pce.71004

    来源:国家柑桔苗木脱毒中心

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    所徽“天圆地方”,反映中柑所人“壹志嘉树”,以推进柑桔科技进步、产业发展为立所根本之严谨风格和博大胸怀;核心的圆形简洁勾画出“柑桔”、形象反映出中柑所专注柑桔科研的行业特征;而围绕主体的弧线代表了科技,象征着中柑所人“修远求索”的治学态度,求真务实的科研精神;星形元素立意中柑所人志在建立一个“方圆”宇宙之间柑桔科研领域的一颗的明星,闪闪发光,惠泽全人类。

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